技術服務
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準備工作
1、采精員一手帶雙層手套,另一手持37℃保溫杯(內裝1次性食品袋)用于收集精液;
2、飼養員將待采精的公豬趕至采精欄,用0.1%高錳酸(如果不好掌握濃度,可以用聚維酮碘溶液)清洗其腹部和包皮,再用溫水(夏天用自來水)清洗干凈,避免藥物殘留對精子的傷害;
3、采精員擠出公豬包皮積尿,按摩公豬包皮部,刺激其爬跨假豬臺;
4、公豬爬跨假豬臺并逐步伸出陰莖,脫去外層手套,將公豬陰莖龜頭導入空拳;
5、用手(大拇指與龜頭相反方向)緊握伸出的公豬陰莖螺旋狀龜頭,順其向前沖力將陰莖的“s’’狀彎曲拉直,握緊陰莖龜頭防止其旋轉,公豬即可射精;
6、用四層沙布過濾(二收集濃份精液于保溫杯內的一次性食品袋內,最初射出的少量精液含精子很少,可以不必接取,有些公豬分2-3個階段將濃份精液射出,直到公豬射精完畢,射精過程歷時5-7分鐘;
7、采精員應注意安全,一旦公豬出現攻擊行為,采精員應立刻逃至安全角;
8、下班之前徹底清洗采精欄;
9、采精期間不準毆打公豬,防止出現性抑制;
10、采精頻率:成年公豬每周2次,青年公豬(1歲左右)每周1次。最好固定每頭公豬的采精頻率; 11、公豬采精調教:①后備公豬7月齡開始進行采精調教;②每次調教時間不超過15分鐘;③一旦采精獲得成功,分別在第2、3天再采精1次,進行鞏固掌握該技術;④采精調教可采用發情母豬誘導、觀摩有經驗公豬采精、以發情母豬分泌物刺激等方法;⑤調教公豬要有耐心,不準打罵公豬;⑥注意公豬和調教人員的安全。
稀釋液配制操作規程
1、配制稀釋液的藥品要求選用分析純試劑,對含有結晶水的試劑要按摩爾濃度進行換算(如含水葡萄糖和無水葡萄糖);
2、按稀釋液配方,用稱量紙、電子天平準確稱量藥品;
3、按1000ml、2000ml劑量稱量稀釋粉,置于密封袋中;
4、使用前將稱量好的稀釋粉溶于定量的雙蒸水中,可用磁力攪拌器助其溶解;
5、用濾紙過濾,以盡可能除去雜質;
6、用1ml稀鹽酸或1ml氫氧化鈉調整稀釋液的ph值為7.2(6.8-7.4)左右,滲透壓為330mosm;稀釋液配好,應及時貼上標簽,標明品名、配制日期和時間、經手人等;
7、要認真檢查已配制好的稀釋液成品,發現問題及時糾正;
8、液態狀稀釋液冰箱4℃保存,不超過24小時,超過有效貯存期的變質稀釋液應廢棄。
精液質量的檢查操作規程
1、精液量:以電子天平稱量精液,按每克1毫升計,避免以量筒等轉移精液盛放容器的方法測量精液體積; 2、顏色:正常的精液是乳白色或淺灰白,精子密度越高,色澤愈濃,其透明度愈低。如帶有綠色或黃色是混有膿液或尿液,若帶有淡紅色或紅褐色是含有血液。這樣的精液應舍棄不用,會同獸醫尋找原因;
3、氣味:豬精液略帶腥味,如有異常氣味,應廢棄;
4、ph值(酸堿度):以ph計測量(ph計使用見說明書);
5、精子活率檢查:活率是指呈直線運動的精子百分率,在顯微鏡下觀察精子活率,一般按0.1-1.0 的十級評分法進行,鮮精活率要求不低于0.7;
6、精子密度:指每毫升精液中所含的精子數,是確定稀釋倍數的重要指針。要求用血細胞計數板進行計數或精液密度儀測定。血細胞計數板計數方法:①以微量加樣品取具有代表性原精液100μl,3%nac l900μl,混勻,使之稀釋10倍;②在血細胞計數室上放一蓋玻片,取1滴上述精液放入計數板的槽中,靠虹吸將精液吸入計數室內;③在高倍鏡下計數5個中方格內的精子總數,將該數乘以50萬,即得原精液每毫升的精子數(即精液密度)。精液密度儀使用見其說明書;
7、精子畸形率:畸形率是指異常精子的百分率,一般要求畸形率不超過18%,其測定可用普通顯微鏡,但需伊紅或姬姆沙染色,相差顯微鏡可直接觀察活精子的畸形率,公豬使用過頻或高溫環境會出現精子尾部帶有原生質滴的畸形精子;畸形精子種類很多,如:巨型精子、短小精子、雙頭或雙尾精子,頂體膨脹或脫落、精子頭部殘缺或與尾部分離、尾部變曲。要求每頭公豬每兩周檢查一次精子畸形率;
8、按要求做好精液質量檢查登記表;
9、實事求是地填寫種公豬健康狀況登記表,從而真實地反應種公豬健康狀況。
精液的稀釋操作規程
1、精液采集后應盡快稀釋,原精貯存不超過30分鐘;
2、未經質量檢查或檢查不合格(活力0.7以下)的精液不能稀釋;
3、稀釋液與精液要求等溫稀釋,兩者溫差不超過1℃,即稀釋液應加熱至33℃-37℃,以精液溫度為標準,來調節稀釋液的溫度,絕不能反過來操作;
4、稀釋時,將稀釋液沿盛精液的杯(瓶)壁緩慢加入到精液中,然后輕輕搖動或用消毒玻璃棒攪拌,使之混合均勻;
5、如作高倍稀釋時,應進行低倍稀釋(1:1-2),稍待片刻后再將余下的稀釋液沿壁緩慢加入,以防造成“稀釋打擊”;
6、稀釋倍數的確定:活率≥0.7的精液,一般按每個輸精劑量含40億個總精子,輸精量為80-90ml確定稀釋倍數,例如:某頭公豬一次采精量是200ml ,活力為0.8,密度為2億/ml,要求每個輸精劑量是含40億精子,輸精量為80ml,則總精子數為200ml×2億/ml=400億,輸精頭份為400億÷40億=10份,加入稀釋液的量為10×80ml-200ml=600ml;
7、稀釋后要求靜置片刻再作精子活力檢查,如果稀釋前后活力一樣,即可進行分裝與保存,如果活力下降,說明稀釋液的配制或稀釋操作有問題,不宜使用,并應查明原因加以改進;
8、不準隨便更改各種稀釋液配方的成分及其相互比例,也不準幾種不同配方稀釋液隨意混合使用;
9、稀釋液的配方見附表。
精液的常溫保存的操作規程
1、精液稀釋后,檢查精液活率,若無明顯下降,按每頭份80-90 ml分裝;
2、瓶上加蓋密封,并在輸精瓶上寫清楚公豬的品種、耳號,采精日期(月、日、時);
3、置22℃-25℃的室溫1小時后(或用幾層毛巾包被好后)直接放置17℃冰箱中;
4、保存過程中要求每12小時將精液混勻一次,防止精子沉淀而引起死亡;
5、每天檢查精液保存箱溫度并進行記錄,若出現停電應全面檢查貯存的精液質量;
6、盡量減少保存精液保存箱關開次數,以免造成對精子的打擊而死亡。
發情鑒定技術的操作規程
1、母豬發情周期平均21天(19--23天),大多數經產母豬一般在仔豬斷奶后的一周內(3--7天),可再次發情排卵,配種受胎;
2、母豬發情周期可分為發情前期、發情期、發情后期和間情期,母豬只有在發情才允許公豬爬跨或稱之為站立反應,此性行為表現可作為母豬適時輸精的指標;
3、各期特征,略述如下:①發情前期:母豬舉動不安,外陰腫脹,并由淡黃色變為紅色這種變化在后備母豬較為明顯;陰道有粘液分泌,其粘度漸漸增加。在此期母豬不允許人騎在背上,平均可有2.7天,不宜輸精配種。②發情期:平均約2.5天,特征為母豬陰部腫脹及紅色開始減退,分泌物也變濃厚,粘度增加。此時母豬允許壓背而不動,壓背時,母豬雙耳豎起向后,后肢緊繃。③發情后期:1-2天,發情母豬的陰部完全回復正常,不允許公豬爬跨;④間情期:13-14天,完全恢復正常狀態;
4、發情鑒定:每日最少要做兩次試情(每天上午6:30-8:30和下午16:00-17:30進行發情檢查),即在安靜的環境下,有公豬在旁時,壓背,以觀察其站立反應。試情公豬一般選用善于交談、唾液分泌旺盛、行動緩慢的老公豬;
5、作好發情檢查的完整記錄:包括發情母豬耳號、胎次、發情時間、外陰部變化、壓背反應等,尤其是后備母豬的記錄。
輸精操作規程
1、輸精次數:①第1次自然交配、第2、3次人工授精;②2次人工授精;③3次人工授精;
2、輸精時間:①斷奶后3-6天發情的經產母豬,發情出現站立反應后6-12小時進行第1次輸精配種;②后備母豬和斷奶后7天以上發情的經產母豬,發情出現站立反應,就進行配種(輸精);
3、精液檢查:從17℃保存箱取出的精液,輕輕搖勻,用已滅菌的滴管取1滴放于預熱的載玻片,置于37℃的恒溫板上片刻,用顯微鏡檢查活力,精液活力≥0.7,才可進行輸精;
4、將試情公豬趕至待配母豬欄之前,使母豬在輸精時與公豬口鼻部接觸;
5、輸精人員消毒清潔雙手;
6、用0.1%高錳酸鉀水溶液清潔母豬外陰、尾根及臀部周圍,再用溫水浸濕毛巾,擦干外陰部;
7、從密封袋中取出沒受任何污染的一次性輸精管(手不應接觸輸精管前2/3部分),在其前端涂上精液作為潤滑液;
8、將輸精管45度角向上插入母豬生殖道內,輸精管進入3-4cm之后,順時針旋轉,當感覺有阻力時,繼續緩慢旋轉同時前后移動,直到感覺輸精管前端被鎖定(輕輕回拉不動),并且確認真正被子宮頸鎖定;
9、從精液貯存箱取出質量合格的精液,確認公豬品種、耳號;
10、緩慢顛倒搖均精液,用剪刀剪去瓶嘴,接到輸精管上,開始進行輸精;
11、用針頭在輸精瓶底部扎一個小孔,撫摸母豬的乳房或外陰、壓背刺激母豬,使其子宮收縮產生負壓,將精液吸納;輸精時勿將精液擠入母豬生殖道內,防止精液倒流;
12、控制輸精瓶的高低來調節輸精時間,輸精時間要求3-5分鐘,輸完一頭母豬后,應在防止空氣進入母豬生殖道的情況下,把輸精管后端一小段折起,放在輸精瓶中,使其滯留在生殖道內3-5分鐘,讓輸精管慢慢滑落;
13、從17℃精液保存箱中取出的精液,無需升溫至37℃,搖勻后可直接輸精,但檢查精液活力需將玻片預熱至37℃;
14、經產母豬用一次性海綿頭輸精管,輸精前檢查海綿頭是否松動;后備母豬用一次性螺旋頭輸精管。為防止子宮炎發生,每頭母豬每次輸精都應使用一條新的輸精管;
15、每頭母豬在一個發情期內要求至少輸精兩次,最好三次,兩次輸精時間間隔8小時左右;
16、認真登記母豬生產卡、配種記錄。
2008-11-29
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